呼出气水蒸气液检测在肺癌中的研究与应用

仆吸系统癌是全世界上发病数万人和病死数万人最低的恶性，有约20年来，而今仆吸系统癌引发的丧命极限过肝癌总尸检的20%。由于一时期仆吸系统癌的流行病学症状不明显，80%的仆吸系统肝癌状就诊时已属之前晚期，其之前50%以上症状不能动手术且5年生存数万人仅10%。改善病状的最重要就在于一时期注意到、一时期临床。仆此番凝结液（exhaled breath condensate，EBC）样品很强无心理因素、简单易操作、可间歇透过等优点，其之前某些成分的相当大巨大变化可以揭示仆吸系统内及胸腔内的病理生物体状况，将会成为高危群体筛查一时期仆吸系统癌及辅助仆吸系统癌一时期临床、健康状况成现异常及辨别的新型行为，但是在此之前仍保持稳定冒险阶段，由此可知有很多争论不休的问题。

1 EBC样品的概况

清醒仆吸时，仆此番体通过特殊的凝结电子装改置形成氢气，即为EBC。用于EBC搜罗的电子装改置主要有3种：一为美国生产商的RTUBE可移动电子装改置，正之前间改置一薄膜管，凝结后的液体可附于内内层；二为德国埃里希积有限公司生产商的Ecoscreen电动制冷电子装改置；另外国内也有自制凝结电子装改置的另据。皆包括一含单向阀门的制冷管，可将吸入气和仆此番分立，尽量降低间歇吸入仆此番，且采集时促请受试者漱口，带鼻夹排除食道，鼻安所产生有机物的依赖性，有肠道时嘱其吞下，咳嗽时必需暂停搜罗。受试者经口仆吸10～15 min，凝结器之前可搜罗1～3 ml凝结物，搜罗标本必需通过样品其之前酵母菌的含用量来已确定是否实际上肠道的污染。与有别于样品行为相对来说，EBC样品很强真正仅仅无创、定时、可视一个系统成现异常、适用群体不够广等劣势。

EBC为一种高度一定量的体液，通过特殊的、高度敏感的样品工具可加到一些挥发性有机物（如磷酸化、氢气等）、非挥发性有机物（如亚盐、氨及有毛细血管活性的胺类有机物）、受体质、、小分子及一些糖类代谢等。学术研术士另据在EBC之前可以样品到数千种有机物，且随之有重新有机物被样品到，它们主要来自下仆吸道钢制液，猜测相信是仆吸气流形成“风暴”将胸腔钢制液“刮落”或是吸气时胸腔扩张形成的张力将碎屑液相“断裂”常因。这些有机物可随疟疾及治疗打压等而变动。通过对EBC之前的这些机械分子（一般相对来说分子质用量小于65 000）或pH值等参数的巨大变化透过样品，可揭示氧化物损伤、炎症等胸腔状况。

对于EBC样品的学术研术士主要集之前于选用病例一对应学术研术士或横、纵向学术研术士工具等透过EBC之前可样品肽链及pH等的学术研术士，为运用于流行病学临床、鉴别临床发放测试依据；找负面影响EBC样品的可能因素，如搜罗设备、搜罗工具、样品工具等来透过EBC样品规范化方面的学术研术士。在此之前国内外学术研术士较多的是EBC之前的炎性研术士课题，如过氧化物氢、磷酸化及其关的产物（盐/亚盐）、素、白三烯等，这在胸腔炎症的I成现异常和治疗方面有着重要的运用商业价值。许多人类学家通过学术研术士注意到在EBC之前找仆吸系统癌酪氨酸的研术士课题及合组多种研术士课题来透过仆吸系统癌临床对仆吸系统癌的筛查、一时期临床、健康状况成现异常及病状辨别也有着重要的运用意义。

2 仆吸系统肝癌状EBC之前可样品的主要肽链及其意义

仆吸系统癌的形成是一个多阶段、多方法、多等位基因进行的反复，在相异阶段相继或同时有相异等位基因或受体质肽链等的变动。在此之前关于EBC之前仆吸系统癌标记物样品的学术研术士越来越多，主要分为酪氨酸标记物和非酪氨酸标记物，前者包括氧化物应激或炎性标记物等，后者主要包括毛细血管生成及等位基因凋亡等关的的标记物等。

2.1 氧化物应激研术士课题 学术研术士说明氧化物应激引致体内氧化物剂与抗氧化物剂高度失衡，进而引发人体内过氧化物是仆吸系统癌发生、发展反复之前的一个重要方法，8-异素、过氧化物氢可作为体内氧化物应激的用量化这两项。1994年Khyshiktyev等学术研术士驳斥仆吸系统肝癌状EBC之前人体内过氧化物产物高度低于正常群体。后有学术研术士说明，以肥胖肺癌为对应，仆吸系统肝癌状血清之前8-异素的高度是增加的，且在进展期仆吸系统癌之前下降时不够明显，而在仆吸系统肝癌状EBC之前其高度无下降时，且与流行病学再行、岁数等无相当大关联。另有人类学家对21例非小受体质仆吸系统肝癌状、21名非吸烟者肥胖者、13名曾肺癌、16名现肺癌EBC透过样品，注意到仆吸系统肝癌状EBC之前8一异素、过氧化物氢高度明显高于吸烟者群体。人体内过氧化物产物在仆吸系统肝癌状EBC之前的高度巨大变化由此可知实际上着争议，且氧化物应激与多种疟疾之外密切关的，因此其用量化这两项在仆吸系统癌一时期临床及健康状况成现异常运用之前由此可知必需进一步冒险。

2.2生长肽链/内皮素 内皮素-1是由21个组成的，很强缓冲有丝分裂和毛细血管舒缩等能力。仆吸系统动脉内皮受体质、黏膜受体质、胸腔上皮受体质皆可表皮大用量内皮素，刺激毛细血管黏膜受体质、成纤维受体质等的增殖，进行仆吸系统癌的发生、发展。Carpagnano等学术研术士注意到在大部份非小受体质仆吸系统癌受体质株之前可样品到高度下降时的内皮素-1，并样品了30例仆吸系统肝癌状EBC之前内皮素-1的高度，与肥胖小鼠相对来说，其高度是相当大上升的，且与仆吸系统癌再行呈正关的，且Ⅰ期仆吸系统肝癌状在动康复，EBC之前的内皮素-1高度也其所攀升，从而初步应为EBC之前内皮素-1可以作为一种仆吸系统癌一时期临床的研术士课题，也可运用于对仆吸系统癌的健康状况成现异常。

另外，Carpagnano等还学术研术士注意到非小受体质仆吸系统肝癌状EBC之前白介素2、白介素6的高度是相当大上升的，但是这些炎性受体质肽链的酪氨酸不高，可伴随机体心理因素、炎症和等多种病变。有学术研术士驳斥内皮素-1高度的上升也可显现成来在仆吸系统动脉高压、仆吸系统纤维化症状及炎性仆吸系统疟疾症状的EBC之前；白介素6的高度在慢性阻塞性仆吸系统疟疾、脑膜炎症状EBC之前相当大上升，因此这些生长肽链类的研术士课题在原则上运用于仆吸系统癌时很强显然。当显现成来结果不一致时，不应与其他仆吸系统癌研术士课题合组运用透过系统性和学术研术士，进而为其在仆吸系统癌一时期临床等方面的运用发放不够多的测试依据。

2.3毛细血管生成关的肽链 学术研术士声称毛细血管内皮生长肽链（VEGF）、溶成纤维受体质生长肽链（bFGF）等多种活性有机物进行缓冲毛细血管生成，可作为特异的分子研术士课题。2008年Gessner等学术研术士驳斥与肥胖群体和慢性阻塞性仆吸系统疟疾症状EBC之前毛细血管关的肽链高度相对来说，非小受体质仆吸系统肝癌状EBC之前VEGF、bFGF、毛细血管生成素的高度相当大上升，但与仆吸系统癌再行、解剖学和一个表征类型无相当大关联。经过2次疗程后（肿块半径至少降低25%）的症状，EBC之前毛细血管关的肽链的高度相当大攀升，初步相信通过样品EBC之前毛细血管关的肽链的高度对指导仆吸系统癌治疗及成现异常治疗反应很强重要的意义，但仍必需要透过大规模的为基础和流行病学学术研术士来发放测试依据。

2.4小分子在仆吸系统癌发生与发展反复之前，大用量增生的冠状动脉或胸腔上皮受体质的DNA可同样扶落到仆吸道钢制液之前，猜测在EBC之前透过等位介导系统性用于仆吸系统癌一时期临床是很强必要性的。在此之前热点主要集之前于在EBC之前冒险酪氨酸的微卫星变动肽链、样品p53等位基因凋亡及等位基因残基转录状况等。

2.4.1 微卫星变动 Hung等注意到在仆吸系统肝癌状的3p14、3p21和3p25等各部位显现成来频密的等位等位基因酪氨酸遗失。Miozzo等运用PCR结合微卫星计量注意到在3p21、3p24和3p25等各部位显现成来微卫星不稳定度。因此量度3p肽链微卫星变动对仆吸系统癌的临床有一定的商业价值。2005年Carpagnano等搜罗30例非小受体质仆吸系统肝癌状和20名肥胖受试者的EBC和全血，分离成DNA并样品3p周边的5个微卫星肽链 （D3S238、 D3S1266、 D3S1300、 D3S1304、D3S1289），注意到在非小受体质仆吸系统癌组之前，53%的EBC-DNA和10%的全血-DNA之前可样品到微卫星变动，而在肥胖小鼠，13%的EBC- DNA和2%的全血一DNA之前可样品到，说明在冒险仆吸系统癌特异的微卫星变动之前，EBC-DNA很强不够高的敏感性，另外结果还显示在仆吸系统肝癌状EBC-DNA之前微卫星变动个数与受试者吸烟者用量同样相当大关的，示意该行为可在对高危群体透过仆吸系统癌筛查和临床等方面很强一定的运用商业价值。

随后Carpagnano等又声称了对非小受体质仆吸系统肝癌状EBC-DNA 3p周边之前微卫星肽链系统性的结果与其所仆吸系统癌一个组织之前的系统性结果很强连续性，通过样品EBC-DNA可以揭示体受体质的凋亡。另外学术研术士注意到EBC之前3p周边微卫星变动的个数与非小受体质仆吸系统肝癌状的病状相当大关的，其之前D3S1289肽链谓之减数分裂遗失与仆吸系统腺肝癌状病状呈负关的，而D3S2338肽链的谓之减数分裂遗失则负面影响仆吸系统鳞肝癌状的病状。有学术研术士说明ERCC是腺嘌呤外科手术修复通路的限速激酶，也进行到仆吸系统癌的发生、发展之前。基于此，Carpagnano等对34例非小受体质仆吸系统肝癌状、33名肥胖义工（19名非肺癌，14名肺癌）透过学术研术士，样品来自EBC和全血的DNA的19q周边2个微卫星肽链：D19S908（ERCC-1等位基因座点）和D19S393（ERCC-2等位基因座点），并对其之前25例仆吸系统肝癌状透过随访学术研术士，结果显示在肥胖非肺癌EBC和全血DNA之前未样品到微卫星变动；肥胖吸烟者组和非小受体质仆吸系统癌组各有16%和25%的EBC-DNA可样品到微卫星变动；EBC-DNA的微卫星变动数万人与受试者吸烟者用量及症状病状有关（D19S393谓之减数分裂缺失与病状密切关的），与仆吸系统癌一个组织类型无关。

虽然被检样本数最较少且学术研术士由此可知保持稳定一时期阶段，还必需进一步深入学术研术士，但学术研术士医务人员相信，在仆吸系统肝癌状EBC之前可样品到微卫星变动，其HIV数万人相当大高于肥胖对应，且HIV检成数万人高于全血，对仆吸系统癌的一时期筛查、临床及健康状况成现异常随访很强必要性。

2.4.2 凋亡型p53等位基因 大用量术士说明，p53等位基因之前热点凋亡密码子的显现成来与谷物之前的多环芳香烃类DEHP（如苯并芘等）有关，样品p53等位基因凋亡可以揭示癌前病变的损害以往，示意在EBC之前样品p53等位基因凋亡点对于高危群体筛查一时期仆吸系统癌很强一定的酪氨酸。2004年，Gessner等招募18例非小受体质仆吸系统肝癌状（皆为肺癌）和18名肥胖义工（4名已戒烟5年以上，余为非肺癌），搜罗EBC，分离成DNA，选用巢式PCR测试扩增p53等位基因的第5肽链至第8肽链并分子生物学透过观察，注意到11例非小受体质仆吸系统肝癌状之前有4例实际上p53等位基因凋亡（36.4%），肥胖义工之前未样品到p53等位基因凋亡；且注意到在EBC之前样品到的p53等位基因凋亡状况与在其所一个组织之前样品到的凋亡状况不一致，学术研术士者相信这可以用周边性增生来解释，EBC可以揭示胸腔及仆吸系统实质的整体状况，而活一个组织检查因取材的显然，仅能揭示局部增生状况。同时注意到实际上冠状动脉不近似于增生的症状EBC之前可检成凋亡的p53等位基因，p53受体HIV的不近似于增生受体质同时有p53等位基因凋亡，极端于维持其最重要在于的不近似于增生，部分发展为鳞癌。因此猜测在EBC之前样品p53等位基因成现异常仆吸系统癌是可能的，但全面性进一步学术研术士，运用于流行病学由此可知有差。

2.4.3 DNA转录有测试证明残基极限转录可同样或间接某种原因转录的透过；也可通过5-乙基胞嘧啶扶乙基抑止胞嘧啶转变为胸腺嘧啶，引发等位基因改置换凋亡，抑止等位介导异常；还可引致等位基因组之前其所周边线粒体结构巨大变化，使线粒体高度螺旋化，凝缩成团，引发等位介导不稳定等进而抑止遗传病或。

2009年Han等对17例仆吸系统肝癌状和37名肥胖义工透过学术研术士，选用亚氢盐处理后分子生物学法样品受试对象EBC之前Ras关的周边家族1A等位基因（RASSF1A）与丧命关的磷酸化等位基因（DAPK）残基转录的状况。结果显示2种等位基因残基转录以往及空间分布状况有着很小的个体差异；RASSF1A转录的以往与受试对象吸烟者以往关的；DAPK等位基因的-63周边的CpG肽链在仆吸系统癌组和非仆吸系统癌组之间实际上着差异；残基转录以往与仆吸系统癌再行及一个表征无关的。这些示意在EBC之前样品等位基因转录是必要的，有可能发放关于吸烟者渗入及疟疾状况等的信息。

3 实际上的问题与展望

EBC样品是一种全重新工具，可发放下仆吸道和仆吸系统实质的一时期病变信号，其搜罗设备很强可移动的特点，搜罗不受岁数、性别、健康状况以往的负面影响，搜罗反复就会变动仆吸道自然环境等使得EBC样品行为很强仅仅无创、简便快捷、可视实时一个系统成现异常等劣势，几乎可以运用于所有症状（包括小儿症状、工程学通气症状及昏迷症状等）。然而该行为还保持稳定冒险的初级阶段，相异人类学家的学术研术士结论还实际上差异，甚至互相矛盾，难以踏入流行病学运用。EBC之前所样品到的有机物比如说的具体解剖定位由此可知不明了，欠缺酪氨酸；EBC为一高度一定量的体液，其之前某些有机物浓度极低，不易样品；EBC的一定量度在个体间实际上着很小的差异，在此之前由此可知欠缺已确定EBC一定量度统一的工具，从而可能会负面影响对样品结果的审计；由此可知无大规模群体的学术研术士另据，欠缺各种有机物在EBC之前的正常估测；学术研术士者所用的设备或搜罗及样品工具相异，可能得成相异的结果，也使得结果之间欠缺可比性；该工具的重复性和稳定度也必需要进一步学术研术士声称。另外，运用该行为透过仆吸系统癌临床的酪氨酸与敏感度仍全面性进一步的测试学术研术士，然而随着样品技术的进一步改进及对仆吸系统癌发生、发展反复和分子机制学术研术士的随之深入，样品EBC之前仆吸系统癌关的的机械标记物定能在流行病学学术研术士仆吸系统癌发病机制、仆吸系统癌筛查、健康状况成现异常、审计和随访等方面显示成举足轻重的地位。

撰稿： tianyusheng